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Ⅲ型前膠原(PCⅢ)ELISA 試劑盒

簡要描述:Ⅲ型前膠原(PCⅢ)ELISA 試劑盒 procollagen type Ⅲ!本公司長期經營代理試劑盒,價格實惠,質量保證,價格請咨詢在線人員。

  • 產品型號:PCⅢ
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2024-02-29
  • 訪  問  量:1500

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Ⅲ型前膠原(PCⅢ)ELISA 試劑盒

酶標抗體標記效果測定:測定內容包括酶和抗體活性、結合物中酶含量和IgG含量、酶與IgG摩爾比值以及結合率。

Ⅲ型前膠原(PCⅢ)ELISA 試劑盒

間接法

間接法常用于檢測抗體,一般的操作步驟為:

  1. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。

  2. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次抗體,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。

  3. 洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測的一次抗體鍵結。

  4. 洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評估有色終產物的含量即可測量待測抗體的含量。

操作程序

1.   分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準品孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品孔中加入標準品50μl;在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。輕輕晃動混勻,37℃溫育60分鐘。

2.   棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復5次,拍干。

3.   每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

4.   取出酶標板,每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

5.   測定:以空白孔調零,在450nm波長下測量各孔的吸光度值(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

6.   根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了的,其實際濃度應該乘以總稀釋倍數。

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