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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的清潔十分重要

更新時(shí)間:2019-08-19      點(diǎn)擊次數(shù):980
       ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)清潔方面應(yīng)注意的事項(xiàng):
  1.洗板
  ①保證洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(選擇潔凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
 ?、诤侠戆才牛蚨嘤脦着_(tái)洗板機(jī)。
  2.讀板
  應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔,在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不觸摸次氯酸;盡可能完結(jié)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有用前進(jìn)檢測(cè)質(zhì)量。
  3.加樣
  ①標(biāo)本為血清:將血液先天然寄存1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后有必要當(dāng)即倒置采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
 ?、诩訕雍蠹皶r(shí)放入孵箱。
 ?、奂用冈噭┖笥梦?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
 ?、苋绻x用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
  ⑤標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。

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